(二)MCAO模型制备的操作方法与步骤
1.线栓的制备 选用直径为0.26mm的钓鱼线,用锋利薄刀片将线身垂直截成5cm长的小段,用细砂纸打磨头端棱角,在体视镜下选出头端光滑钝圆、大小一致者。用记号笔在距线栓头端20mm处做一标记,将线栓浸泡消毒后晾干。术前置于无菌生理盐水中备用,线栓临用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素钠。
2.术前动物准备 分笼饲养(室温20~23℃,湿度60%~70%),明暗光照12h:12h,适应性饲养1~2d,并按实验动物使用的3R原则给予人道关怀。术前12h禁食,自由饮水。
4.手术步骤 手术按外ke无菌原则操作。
①备皮,碘伏消毒皮肤。
②于正中线旁开约5mm处,行颈部右侧纵行切口,剪开浅筋膜,暴露右侧胸锁乳突肌,在胸锁乳突肌与颈前肌群之间向深部钝性分离,暴露颈动脉鞘,玻璃分针游离颈总动脉(CCA)和迷走神经,直至 CCA分叉处。钝性分离向内行走的颈外动脉(ECA)及向外后行走的颈内动脉(ICA)。
显微镜(小鼠需要),血管夹,尖头直镊,尖头弯镊,显微剪,缝合线,缝合针,线栓,棉球,75% 酒精,生理盐水,电凝笔,动物加热垫,电动剃毛器,牵开器。
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